RT-PCR fíor-ama a chur i bhfeidhm i Covid-19

Cad é RT-PCR fíor-ama?

Tugtar géinte fluaraiseachta fíor-ama PCR, ar a dtugtar Q fíor-ama freisin, ar ghéinte fluaraiseacha a chur leis an gcóras imoibriúcháin PCR, ag baint úsáide as carnadh comhartha fluaraiseachta chun monatóireacht a dhéanamh ar an bpróiseas iomlán PCR i bhfíor-am, agus ansin an teimpléad anaithnid a chainníochtú trí chuar caighdeánach. -PCR.

Tá prionsabal an aimplithe PCR mar an gcéanna le prionsabal na gnáth-ionstraime PCR, ach amháin go bhfuil na préimheanna a chuirtear le linn aimpliú PCR lipéadaithe le hiseatóip, fluaraiscein, srl., Agus go n-úsáidtear na préimheanna agus na tóireadóirí fluaraiseacha chun ceangal go sonrach leis an teimpléad aimplithe ag an t-am céanna.

Bailítear agus tarchuirtear na torthaí aimplithe chuig an gcóras anailíse agus próiseála ríomhaire trí chomhartha bailiúcháin fíor-ama an chórais bailithe comharthaí fluaraiseachta chun aschur cainníochtúil torthaí fíor-ama a fháil.

Tá RT-PCR fíor-ama ar cheann de na modhanna saotharlainne is mó a úsáidtear chun an víreas COVID-19 a bhrath. Cé gur bhain go leor tíortha úsáid as RT-PCR fíor-ama chun galair eile a dhiagnóisiú, amhail víreas Ebola agus víreas Zika, teastaíonn tacaíocht ó go leor acu chun an modh seo a oiriúnú don víreas COVID-19, chomh maith lena gcumas tástála náisiúnta a mhéadú.

Conas a oibríonn RT-PCR fíor-ama leis an víreas COVID-19?

Bailítear sampla ó na codanna den chorp ina mbailíonn an víreas COVID-19, mar shampla srón nó scornach duine. Déileáiltear leis an sampla le roinnt tuaslagán ceimiceach a bhaineann substaintí cosúil le próitéiní agus saillte agus nach mbaineann ach an RNA atá sa sampla. Is meascán é an RNA eastósctha seo d’ábhar géiniteach an duine féin agus, má tá sé i láthair, RNA an víris.

Déantar an RNA a thras-athscríobh go DNA ag úsáid einsím ar leith. Ansin cuireann eolaithe blúirí gearra breise de DNA atá comhlántach le codanna ar leith den DNA víreasach tras-scríofa. Má tá an víreas i láthair i sampla, ceanglaíonn na blúirí seo iad féin le codanna sprice den DNA víreasach. Úsáidtear cuid de na blúirí géiniteacha breise chun snáitheanna DNA a thógáil le linn an aimplithe, agus úsáidtear na cinn eile chun an DNA a thógáil agus chun lipéid marcóra a chur leis na snáitheanna, a úsáidtear ansin chun an víreas a bhrath.

Ansin cuirtear an meascán i meaisín RT-PCR. Rothaíonn an meaisín trí theochtaí a théamh agus a fhuaraíonn an meascán chun imoibrithe ceimiceacha ar leith a chruthú a chruthaíonn cóipeanna nua comhionanna de na sprioc-chodanna de DNA víreasach. Déantar an timthriall arís agus arís eile arís agus arís eile chun na codanna sprice de DNA víreasach a chóipeáil. Déanann gach timthriall an uimhir roimhe seo a dhúbailt: déantar dhá chóip de cheithre chóip, déantar ceithre chóip ocht, agus mar sin de. Is gnách go dtéann bunú caighdeánach fíor-ama RT-PCR trí 35 timthriall, rud a chiallaíonn, faoi dheireadh an phróisis, go gcruthófar timpeall 35 billiún cóip nua de na codanna de DNA víreasach ó gach snáithe den víreas atá sa sampla .

De réir mar a thógtar cóipeanna nua de na rannáin víreasacha DNA, ceanglaíonn na lipéid marcóra leis na snáitheanna DNA agus ansin scaoileann siad ruaim fluaraiseach, a thomhaiseann ríomhaire an mheaisín agus a chuirtear i láthair i bhfíor-am ar an scáileán. Rianaíonn an ríomhaire an méid fluaraiseachta sa sampla tar éis gach timthrialla. Nuair a sháraítear leibhéal áirithe fluaraiseachta, dearbhaíonn sé seo go bhfuil an víreas i láthair. Déanann eolaithe monatóireacht freisin ar an líon timthriallta a thógann sé chun an leibhéal seo a bhaint amach d’fhonn déine an ionfhabhtaithe a mheas: is lú na timthriallta, is déine an t-ionfhabhtú víreasach.

Cén fáth RT-PCR fíor-ama a úsáid?

Tá an teicníc RT-PCR fíor-ama an-íogair agus sonrach agus féadann sí diagnóis iontaofa a sholáthar i chomh beag le trí huaire an chloig, cé go dtógann saotharlanna idir sé agus ocht n-uaire an chloig ar an meán. I gcomparáid le modhanna leithlisithe víris eile atá ar fáil, tá RT-PCR fíor-ama i bhfad níos gasta agus tá poitéinseal níos ísle ann maidir le héilliú nó earráidí, mar is féidir an próiseas iomlán a dhéanamh laistigh d’fheadán dúnta. Is é an modh is cruinne i gcónaí é chun an víreas COVID-19 a bhrath.

Mar sin féin, ní féidir RT-PCR fíor-ama a úsáid chun ionfhabhtuithe san am atá thart a bhrath, rud atá tábhachtach chun forbairt agus leathadh an víris a thuiscint, toisc nach bhfuil víris sa chorp ach ar feadh fuinneog ama ar leith. Tá modhanna eile riachtanach chun ionfhabhtuithe roimhe seo a bhrath, a rianú agus staidéar a dhéanamh orthu, go háirithe iad siúd a d’fhéadfadh a bheith forbartha agus scaipthe gan comharthaí.